کشت سلولی چیست؟

کشت سلولی چیست؟

انواع کشت سلولی:

کشت اولیه: سلول‌ها مستقیماً از بافت جدا شده و عمر محدودی دارند

خط سلولی (Cell Line): سلول‌هایی که توانایی تقسیم نامحدود پیدا کرده‌اند.

کشت سوسپانسیون: سلول‌های شناور در محیط کشت

کشت چسبنده: سلول‌های متصل به سطح

لوازم و تجهیزات اصلی کشت سلولی:

۱. محیط کشت (Culture Medium)

حاوی مواد مغذی، ویتامین‌ها، اسیدهای آمینه

معمولاً شامل: DMEM، RPMI، F12

FBS (Fetal Bovine Serum): مکمل ضروری حاوی فاکتورهای رشد

۲. فلاسک کشت سلول

انواع T25، T75، T175-سطح مناسب برای چسبندگی سلول‌ها-درب صافی‌دار برای تبادل گاز

۳. هود لامینار (Laminar Flow Hood)

ایجاد محیط استریل برای کار-جلوگیری از آلودگی

۴. انکوباتور (Incubator)

دمای ۳۷°C-رطوبت ۹۵٪-CO₂ ۵٪ برای تنظیم pH

۵. سانتریفیوژ

سانتریفیوژ سلول‌ها-جدا کردن supernatant

۶. مواد مصرفی:

تریپسین-EDTA: برای جدا کردن سلول‌های چسبنده

PBS بافر: برای شستشوی سلول‌ها

آنتی‌بیوتیک: پنی سیلین/استرپتومایسین-دیمتیل سولفواکساید (DMSO): برای فریز کردن سلول‌ها

۷. لوازم استریل:

پیپت، نوک پیپت، میکروتیوب-پلیت‌های ۶، ۱۲، ۲۴، ۹۶ چاهکی

 

کاربردهای کشت سلولی:

تولید آنتی‌بادی مونوکلونال-تست سمیت داروها-مطالعه مکانیسم‌های بیماری-تولید واکسن-پزشکی بازساختی

مراحل اصلی کشت سلولی:

۱. پاساژ سلول (Subculture)-شستشو با PBS-هضم با تریپسین-خنثی‌سازی با محیط کشت-سانتریفیوژ و کشت مجدد

۲. فریز کردن (Cryopreservation)-سلول‌ها در محیط حاوی FBS و DMSO-ذخیره در نیتروژن مایع (۱۹۶-°C)

۳. کنترل کیفیت-بررسی آلودگی-شمارش سلول با هموسایتومتر-تست زنده‌مانی

چالش‌های کشت سلولی:

آلودگی (قارچ، باکتری، مایکوپلاسما)-تغییر فنوتیپ سلول‌ها

هزینه بالای مواد مصرفی- نیاز به نیروی متخصص

این تکنیک پایه‌ای برای بسیاری از تحقیقات زیست‌شناسی مدرن و تولیدات بیوتکنولوژی محسوب می‌شود.

پاسخ دهید

آدرس ایمیل شما منتشر نخواهد شد. زمینه های مورد نیاز ایجاد می شود.

بالا